近日，中国农业科学院上海兽医研究所猪传染病风险预警与阻断技术团队先后成功开发出基于p54-Fc标记金纳米颗粒的侧向流试纸条及配套便携设备和p30-Fc标记纳米颗粒荧光探针的便携式免疫传感器，用于快速检测非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体。相关研究成果已分别发表于《Biosensors》和《Journal of Integrative Agriculture》期刊上。

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、高致病性、高度接触性的传染病，可感染家猪与野猪。自该病首次报告以来，目前尚无安全有效的商品化疫苗或特效治疗手段。因此，开发一种快速、简便且高效的抗体检测方法，对于ASF疫情的监测与防控具有重要意义。传统检测方法如ELISA虽灵敏度较高，但存在操作繁琐、耗时久、依赖专业实验室和设备等弊端，难以满足养殖场、基层检疫点等场景的现场检测需求。因此，研发便携、高效、低成本的 ASFV 抗体检测技术，成为疫情监测与防控的关键突破口。

非洲猪瘟p30p54抗体快速检测试纸条及配套便携设备

p54-Fc标记金纳米颗粒的侧向流试纸条及配套便携设备以ASFV关键结构蛋白p54为核心抗原，构建出p54-Fc标记金纳米颗粒的侧向流检测体系，将p54蛋白、金黄色葡萄球菌蛋白 A（SPA）分别包被于试纸条检测线（T线）和质控线（C线），打造出SPA双夹心免疫层析试纸条。这项技术实现了多项突破，15分钟快速出结果，无需专业人员和复杂设备，肉眼即可判读，也可通过便携胶体金检测仪实现定量分析；检测灵敏度达1:320，与其他猪病病毒无交叉反应，和ELISA试剂盒符合率高达98%，且重复性良好，37 ℃密封储存30天仍能保持稳定性能。

在胶体金技术基础上，团队进一步创新，p30-Fc标记纳米颗粒荧光探针的便携式免疫传感器以ASFV结构蛋白p30和IgG Fc融合蛋白（p30-Fc）为抗原，结合荧光微球作为示踪剂，制备SPA双夹心荧光试纸条特异性检测抗ASFV抗体。结果表明，本研究制备的荧光试纸条对ASFV抗体具有较高的敏感性，灵敏度高达1:2560，具有较高的特异性，与其他猪病毒抗体无交叉反应。同时，荧光条检测结果与市售ELISA试剂盒符合率较高（98%），且重复性良好，37 ℃密封储存30天仍能保持稳定性能。此外，该检测方法可在感染后第4天即可检测到抗体，具备良好的早期诊断能力。检测结果可通过一种价格低廉、易于获取的便携式设备读取，操作简便，适合现场快速检测。该荧光试纸条不仅具备快速、灵敏、特异和可视化等优势，也为ASF疫情的早期发现与防控提供了新的技术手段，具有广阔的应用前景。

同时，这两种方法均利用SPA蛋白特异性结合 IgG Fc 段的特性，省去传统试纸条的抗体标记步骤，缩短生产周期、降低检测成本，还为其他病毒抗体检测提供了通用技术平台。两款检测技术各有所长：金纳米试纸条则适配养殖场日常监测、基层检疫、海关口岸快速筛查等现场场景，兼具快速、精准、便携、低成本等优势。荧光传感器可实现疫情极早期预警。未来，这两项技术有望在全国生猪养殖和检疫防控体系中推广应用，为筑牢非洲猪瘟疫情防控屏障、保障生猪产业安全提供坚实的技术保障。

中国农业科学院上海兽医研究所博士研究生杨扬担任该两篇第一作者，马志永研究员和魏建超研究员共同为通讯作者。该项目研究得到了院重大科研任务、上海市农业科技创新项目等项目的支持。

原文链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39852075/

                   https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S209531192500317X